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    酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項

    發(fā)布時間: 2013/8/5  點擊次數(shù): 1174次
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     酶聯(lián)免疫試劑盒(Elisa)是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定,易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,目前已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
    試劑盒操作看似簡便,但要做到十分卻也是個技術活。它對實驗室操作的環(huán)境以及操作人員的操作的熟練程度有著較高的要求。由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的,人為的誤差相對嚴重一些。再此本人結合了自己的工作實踐向大家分享一下酶聯(lián)免疫試劑盒操作時的注意事項。
    ?實驗室的環(huán)境要干凈,防止空氣中的一些細菌或粉塵對實驗造成干擾。?一般的酶聯(lián)免疫試劑盒中的酶標抗體是以辣根過氧化物酶(HRP)進行標記
    的。因此要求樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為NaN3是HRP的抑制劑。?如果樣本是血清,應該充分離心,不得有顆粒。
    ?試劑盒應在保質期內使用。不同批次的試劑盒中的溶液不得混用。?在進行酶聯(lián)免疫實驗之前,應該將試劑盒放置室溫平衡30min以上。?稀釋溶液時,應按照說明書的要求進行稀釋。盡量選用去離子水或雙蒸
    水進行稀釋。
    ?要正確使用移液器,吸取液體要,槍頭上不得留有氣泡。吸取不同的液
    體時,要注意更換槍頭。
    ?加樣時要懸臂加樣,避免槍頭和孔內液體接觸。
    ?建議所有的樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。?孵育時需將微孔用封板膜或保鮮膜封好,防止水分的蒸發(fā)。且封板膜不得重
    復使用。
    洗板時,要注意防止孔間的交叉污染。
    ?由于底物顯色劑對光較敏感,因此進行顯色時,應注意避光。
    ?底物顯色劑為TMB,應避免與皮膚接觸。終止液為2M濃硫酸,具有腐蝕
    性,應避免與皮膚接觸。
    ?酶標儀使用前,應先預熱30min。讀取結果前,輕輕震蕩,使溶液均一。讀
    數(shù)據(jù)時應擦干酶標板底部,且孔內不能有氣泡。
    ?酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

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