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    使用抗Argonaute抗體進(jìn)行microRNA研究的方法介紹

    發(fā)布時間: 2011/12/27  點擊次數(shù): 875次
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    使用抗Argonaute抗體進(jìn)行microRNA研究的方法介紹
    近年來,microRNA(miRNA)成為生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的明星。人類和小鼠含有1000多種microRNA,雖然只有22個左右的堿基,但是在基因表達(dá)調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用,參與細(xì)胞分化、個體發(fā)育,且與多種疾病相關(guān),因此對于miRNA的研究越來越多。

    在細(xì)胞中,成熟的miRNA分子可與Argonaute(Ago)蛋白家族形成RNA沉默復(fù)合體(RISC),降解靶mRNA或者抑制轉(zhuǎn)錄(圖1)。在人類中普遍存在4種Ago蛋白(Ago1-Ago4),在Ago家族蛋白中表達(dá)zui多的是Ago2,它具有Slicer活性,可切割其靶RNA,在microRNA調(diào)控路徑中具有重要意義。針對這種Ago蛋白,利用抗體,經(jīng)RISC免疫沉淀,即microRNA與靶mRNA共沉淀,由此可回收microRNA。
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